Системата за високоефективен течен хроматограф (HPLC) е важен клон на хроматографията и е незаменима технология за разделяне и анализ в областта на съвременната химия, медицина, промишленост, селско стопанство, инспекция на стоки и съдебна инспекция. Той използва течност като подвижна фаза и използва инфузионна система под високо налягане за изпомпване на единичен разтворител с различни полярности или смесени разтворители, буфери и т.н. в хроматографска колона, оборудвана с високоефективна неподвижна фаза. След като компонентите в колоната са разделени, те влизат в детектора за детекция, като по този начин се постига ефективен, бърз и чувствителен анализ на пробата.
Структурни компоненти
Системата за високоефективна течна хроматография включва главно резервоари за съхранение на течности, инфузионни помпи с високо налягане, проби, хроматографски колони, детектори, записващи устройства и устройства за обработка на данни. Сред тях инфузионната помпа за високо налягане е един от основните компоненти на цялата система, която отговаря за изпращането на подвижната фаза в хроматографската колона със стабилно налягане и поток. Хроматографската колона е ключов компонент на разделянето, изпълнена с неподвижна фаза с изключително фини частици. Коефициентите на разпределение на различните съединения между неподвижната фаза и подвижната фаза са различни, като по този начин се постига разделяне. Детекторът преобразува отделените компоненти в електрически сигнали и извежда графиката и резултатите през записващото устройство и устройството за обработка на данни.
Как работи
Принципът на работа на системата за високоефективна течна хроматография се основава на принципа на разделяне на хроматографията, тоест, когато всеки компонент, разтворен в подвижната фаза, преминава през стационарната фаза, той има различни размери и сила на взаимодействие със стационарната фаза (адсорбция, разпределение, изключване и афинитет), а времето на престой в стационарната фаза е различно, така че той изтича от стационарната фаза един след друг. По-конкретно, помпата за високо налягане прониква в подвижната фаза в резервоара за съхранение на течност в системата, а разтворът на пробата навлиза в подвижната фаза през инжектора и се зарежда в хроматографската колона, докато подвижната фаза тече. Тъй като коефициентите на разпределение на компонентите в разтвора на пробата са различни в подвижната фаза и стационарната фаза, когато двете фази се преместват една спрямо друга, след непрекъснат процес на разпределение на адсорбция-десорбция, разстоянието между смесените компоненти постепенно се отваря и накрая изтича от колоната последователно като отделни отделни компоненти. Детекторът преобразува концентрацията на пробата в електрически сигнал и я предава на записващото устройство за отпечатване на данните от пробата под формата на графика.
Предимства и приложения
Системата за високоефективна течна хроматография има характеристиките на висока ефективност на разделяне, бърза скорост на анализ, добра чувствителност на откриване и способност за анализиране и разделяне на термично нестабилни физиологично активни вещества с високи точки на кипене и не могат да бъдат изпарени. Обхватът му на приложение е широк и почти не се ограничава от летливостта и термичната стабилност на аналитичните обекти. Почти всички съединения, включително висока точка на кипене, полярност, йонни съединения и макромолекулни вещества, могат да бъдат анализирани и определени чрез високоефективна течна хроматография. В областите на фармацията, традиционната китайска медицина и традиционната китайска медицина, хранителната наука и технология, системите за високоефективна течна хроматография се използват широко в анализа на лекарства, изследване на пръстови отпечатъци в китайската медицина, откриване на остатъци от пестициди, анализ на хранителни компоненти на храни и др.
Тенденции на развитие
С бързото развитие на съвременната биотехнология и фармацевтичната индустрия, системите за високоефективна течна хроматография също непрекъснато се развиват и подобряват. Настоящата тенденция на развитие е да се насочи към биохимичен и лекарствен анализ и подготовка и да се разработят по-ефективни, чувствителни и бързи методи за разделяне и анализ. В същото време, в отговор на проблемите с високата консумация и токсичността на мобилните фази, екологичните и устойчиви алтернативи също се проучват активно.
За да обобщим, високоефективните системи за течна хроматография играят все по-важна роля в областта на съвременната наука и технологии с техните уникални възможности за разделяне и анализ и широки перспективи за приложение.